液相色譜儀是屬于易學(xué)難用的儀器，特別講究 “正確使用” 和經(jīng)驗(yàn)。液相工作者接觸最多的是流動相，流動相是造成液相色譜各種問題的主要源頭。液相色譜儀*常見的故障一是堵，二是漏。

“

堵”的原因之一：配制流動相時細(xì)菌污染。

堵塞的主要位置就是在液相色譜儀色譜柱的前端，最主要原因就是流動相里有雜質(zhì)，雜質(zhì)的主要來源就是細(xì)菌。  

首先我們要認(rèn)識到，一般的國產(chǎn)甲醇其實(shí)不需要額外過濾處理，直接使用沒有問題。即使是有些固態(tài)微粒雜質(zhì)，也能在液相流路系統(tǒng)最前端的過濾頭上排除，真正容易引起問題的，是水中的細(xì)菌。新制備的純水在室內(nèi)放置幾天就會長菌，而這些細(xì)菌雖然肉眼不可見，卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙，造成柱子很快報(bào)廢。時間過久,濾頭黏附細(xì)菌導(dǎo)致泵液不準(zhǔn)

解決液相色譜儀“堵”的方法很簡單，就是確保水的可靠性。這里有兩種方式推薦：

（1）理想的方式當(dāng)然是購買實(shí)驗(yàn)室zhuan用純水機(jī)，既方便又可靠，質(zhì)量也放心。wei一的缺點(diǎn)就是價格不菲。

（2） 成箱購買市售品牌純凈水，如500ml 一支的怡寶或娃哈哈，這些水的質(zhì)量足以應(yīng)付液相色譜的要求。

這里特別指出一個細(xì)節(jié)：在絕大多數(shù)書本上，凡談到配制流動相都會談到最后有一個過濾的步驟。

在運(yùn)用多元液相色譜儀時的一種不良運(yùn)用習(xí)氣容易造成活動相剛開始沒有長菌，在運(yùn)用時卻產(chǎn)生了細(xì)菌污染。

舉一個例子：50％的甲醇水活動相，有兩種運(yùn)用方式。一種方式是在液相色譜儀上機(jī)前就配好混合在一同，另一種方式是在流路A放純甲醇，流路B放純水。后一種有明顯的優(yōu)點(diǎn)簡單，而且不需求實(shí)驗(yàn)者另個計(jì)算配比混合，其次就是比例jing確，能得到保存時間反復(fù)性*的實(shí)驗(yàn)效果。

但是，后一種方式有一個致命的缺陷是純水在活動相瓶中幾天時間就會長細(xì)菌（很多狀況下不只僅用純水作活動相，而是用緩沖鹽溶液，自身就是優(yōu)質(zhì)肥料，細(xì)菌長得更疾速），一旦有細(xì)菌柱子就壞得很快。

所以這種方式*好是每次實(shí)驗(yàn)都用新制備的純水，并且在每次實(shí)驗(yàn)后把水相換掉，換成甲醇沖洗潔凈。

但是由于液相色譜儀柱子的梗塞是不可逆的，所以，還是比較推薦di一種方式，寧可犧牲較小的保留時間重復(fù)性，也不要用純水溶液作為流動相的一組。

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