對于每一個身經(jīng)百柱的分離純化研究員來說，液相色譜圖是他們打開未知物質(zhì)世界的大門，科研中的很多問題都能從色譜圖中得到很好的反映，有些問題可以通過改變設(shè)備參數(shù)得到解決，而有些問題則必須通過修改操作程序來解決，畢竟，正確選擇色譜柱和流動相才是得到好的色譜圖的關(guān)鍵。小編在此根據(jù)大家實踐中可能會經(jīng)常遇到的一些液相色譜圖譜問題進(jìn)行了整理匯總，大家一起來看一下吧。 
 
一、拖尾峰

1.篩板阻塞：柱子兩頭的過濾篩板如果堵塞，樣品就會在篩板部分受阻而形成時間延遲，使得樣品在柱后流出時峰型形成拖尾。需要通過反沖色譜柱，或者更換篩板。
2.色譜柱塌陷：是指色譜柱由于其它原因引起了柱效率喪失，不能對物質(zhì)形成保留，使得物質(zhì)不在固定相上保留而隨流動相流出，但是又還有一點柱效，因此形成拖尾。需要重新填充色譜柱或者更換色譜柱。
3.有污染：即樣品不在同一起跑線起跑，從后面開始跑得到達(dá)終點稍晚，表現(xiàn)出拖尾。更換色譜柱或者采用有機(jī)溶劑梯度洗脫1h以上，以沖洗柱子。
4.流動相PH值選擇錯誤：如某PH下有的樣品存在分子型和離子型的動態(tài)平衡，離子型的陸續(xù)向分子型轉(zhuǎn)化就會表現(xiàn)出拖尾。調(diào)節(jié)PH值可抑制分子解離，改善拖尾，對于堿性化合物，相對較低的PH值更有利于得到對稱峰。
 
二、前沿峰

1.樣品過載：被保留的樣品在正常出峰時間前陸續(xù)出來，形成前沿峰。降低樣品含量。
2.樣品溶劑選擇不恰當(dāng)：當(dāng)樣品溶劑的洗脫能力大大強(qiáng)于流動相時會出現(xiàn)前沿峰，例如，在反相色譜中用已腈做樣品溶劑，而流動相的洗脫力較弱時會出現(xiàn)前沿峰。選擇流動相或者接近流動相的比例作為樣品溶劑。
3.色譜柱損壞：色譜柱柱效損失，不能對物質(zhì)形成保留。更換色譜柱。
4.在大峰前有小峰出現(xiàn)，假象前沿峰，即大峰前包埋了沒有分開的小峰。調(diào)整流動相洗脫梯度。
 
三、基線漂移

1.柱溫波動：即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動，通常影響示差檢測器、電導(dǎo)檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。使用柱溫箱，控制好柱子和流動相的溫度，在檢測器之前使用熱交換器。
2.流動相不均勻：流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移。使用HPLC級的溶劑，流動相在使用前進(jìn)行脫氣處理。
3.流通池被污染或有氣體：用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸(不要用鹽酸)。
4.流動相配比不當(dāng)或流速變化：更改配比或流速，為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。
5.樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)：以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線。使用保護(hù)柱，如有必要，在進(jìn)樣之間或在分析過程中，定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。