問：用HPLC進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移，有時(shí)發(fā)生快速變化，原因何在?如何解決?
答：關(guān)于漂移問題：
1、溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定
2、流動(dòng)相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等
3、柱子未平衡好，需對(duì)柱子進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的平衡
關(guān)于快速變化問題：
1、流速發(fā)生變化，解決辦法是重新設(shè)定流速，使之保持穩(wěn)定
2、泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。
3、流動(dòng)相不合適，解決辦法為改換流動(dòng)相或使流動(dòng)相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合
問：液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?
答：1、篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。
2、存在干擾峰，解決辦法為使用較長(zhǎng)的柱子，改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子
問：為什么進(jìn)樣器內(nèi)的玻璃襯套會(huì)對(duì)色譜行為造成影響?
答：進(jìn)樣器內(nèi)的玻璃襯套主要有下列作用：
1、提供一個(gè)溫度均勻的汽化室，防止局部過熱。
2、玻璃的惰性不如不銹鋼好，減少了在汽化期間樣品分解的可能性。
3、易于拆換清洗 ，以保持清潔的汽化室表面，一些痕量非揮發(fā)性組分會(huì)逐漸積累殘存于汽化室，高溫下會(huì)慢慢分解，使基流增加，噪聲增大，通過清洗玻璃襯套可以消除這種影響。
4、可根據(jù)需要選擇管壁厚度及內(nèi)徑適宜的玻璃襯套，以改變汽化室的體積，而不用更換整個(gè)進(jìn)樣加熱塊。從以上幾個(gè)方面可以知道玻璃襯套對(duì)色譜行為造成影響的原因。
問：HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法
答：1、樣品量不足：解決辦法為增加樣品量
2、樣品未從柱子中流出：可根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動(dòng)相或柱子
3、樣品與檢測(cè)器不匹配：根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長(zhǎng)或改換檢測(cè)器
4、檢測(cè)器衰減太多：調(diào)整衰減即可。
5、檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)太大：解決辦法為降低時(shí)間參數(shù)
6、檢測(cè)器池窗污染：解決辦法為清洗池窗。
7、檢測(cè)池中有氣泡：解決辦法為排氣。
8、記錄儀測(cè)壓范圍不當(dāng)：調(diào)整電壓范圍即可。
9、流動(dòng)相流量不合適：調(diào)整流速即可。
10、檢測(cè)器與記錄儀超出校正曲線：解決辦法為檢查記錄儀與檢測(cè)器，重作校正曲線。
問：我購(gòu)買的液相色譜柱驗(yàn)收測(cè)試時(shí)柱壓過高，請(qǐng)問為什么?
答：柱壓過高是HPLC柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問題，您可按下面步驟檢查問題的起因。
1、拆去保護(hù)柱，看柱壓是否還高，否則是保護(hù)柱的問題，若柱壓仍高，再檢查；
2、把色譜柱從儀器上取下，看壓力是否下降，否則是管路堵塞，需清洗，若壓力下降，再檢查。
3、將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上，用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子，(此時(shí)不要連接檢測(cè)器，以防固體顆粒進(jìn)入流動(dòng)性)。這時(shí)，如果柱壓仍不下降，再檢查；
4、更換柱子入口篩板，若柱壓下降，說明你的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì)，正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。
