1. 恒度洗脫

一定是將水相與有機(jī)相混合后、抽濾(使用混合型過濾膜)，用一個(gè)管路(如A管)泵入儀器，這是使用的原則。切勿因節(jié)約有機(jī)相、便于摸索色譜條件等原因而使用兩個(gè)管路(一個(gè)純水相、一個(gè)純有機(jī)相)泵入儀器，即便配制了脫氣機(jī)。因此種情形極易造成水相中鹽和表面活性劑的少量析出。

剩余流動(dòng)相可繼續(xù)使用，密封后放置陰涼處;待下次試驗(yàn)時(shí)與新配制的流動(dòng)相混合后抽濾即可。無(wú)需擔(dān)心發(fā)霉、無(wú)機(jī)鹽析出、揮發(fā)、比例不準(zhǔn)等問題，這些皆為疑神疑鬼的表現(xiàn)。

2. 梯度洗脫

流動(dòng)相配制最為科學(xué)的方式是：A相為高比例的水相-低比例的有機(jī)相、B相為低比例的水相-高比例的有機(jī)相(英國(guó)藥典幾乎均如此);其次為：A相為高比例的水相-低比例的有機(jī)相、B相為純有機(jī)相;最不科學(xué)的為：A相為純水相、B相為純有機(jī)相，如既有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)采用了此種方式，建議改為第二種或第一種方式，否則基線漂移嚴(yán)重，難以進(jìn)行穩(wěn)定的雜質(zhì)檢測(cè)。

梯度洗脫結(jié)束后，建議經(jīng)5分鐘回到初始狀態(tài)，再平衡5分鐘后開始下一針測(cè)定。這10分鐘的穩(wěn)定極為關(guān)鍵。切勿短時(shí)間內(nèi)回到初始狀態(tài)，會(huì)對(duì)儀器和色譜柱損傷較大。